恒美智造荧光计售后与低浓度核酸蛋白检测仪故障排查问答

一、荧光读数不对，先分四种情形

第一种是全线偏低。所有样品都比预期低一截，重复性还不错。这种多半是校准过期或者标准液失效，也可能是染料加少了、孵育时间不够。先看校准日期，再看试剂开封日期，两样都正常，才轮到怀疑机器。全线偏低最容易误判，因为它看着像样品的问题。这里说的机器，厂家叫它微量核酸测定荧光计，一个样一两微升，测的是核酸浓度。

第二种是全线偏高。常见原因是空白没做或者做错，也可能是管子不干净、有荧光本底。换一盒新管重测一次，如果数值降下来，问题就在管子上。便宜的管子在生产过程中会带一点荧光增白剂，量不大，但在低浓度样品上足以抬高读数。

第三种是个别样品异常。同一批里只有一两个数不对，先怀疑样品本身：体积取少了、混匀不充分、管里有气泡、样品放置过久发生降解。荧光法的取样量只有一到二十微升，一微升的误差就是百分之五到十，取样这一步的手感比很多人想的更重要。

第四种是忽高忽低，重复性差。这种最难查，通常是多个因素叠在一起：仓盖没关严、环境光漏进来、管壁有水珠、管位没放到底。排查办法是一次只改一个条件，改完测一次，看哪个条件一动数值就稳了。同时改三个条件，等于什么也没查出来。

二、低浓度那一段最考验机器

高浓度样品谁都能测，低浓度才见真章。浓度掉到每微升零点一纳克以下，信号已经很弱，环境光、管壁荧光、电子噪声都开始占分量。这时候读数的可靠性不看标称灵敏度，而看重复性：同一份样连测五次，极差能不能控制在百分之十以内。

低浓度段的规范做法是先做一次空白管，用同样的管、同样的体积、只加缓冲液，把本底记下来。本底高的管子整批换掉，本底稳定的才继续用。这一步在常规检测里常被省，一旦做微量样品，省掉的这一步就会变成数据里甩不掉的偏移。

还有一个细节：低浓度样品不要在管壁上挂液。取样之后轻弹管底、短促离心，让液体全部落到底部，再上机。挂壁的液滴会改变实际光程，读数偏低，而且低得没有规律。做微量检测的人对这一个动作的重视程度，往往决定了他数据的好坏。

如果低浓度段反复测不准，先别怀疑机器坏了。更常见的解释是样品本身在降解或者吸附：核酸会吸附到管壁上，浓度越稀吸附比例越大，放半小时能掉两三成。遇到这种情况，规范做法是取样后立刻测，或者加一点载体让吸附饱和，而不是反复重测求平均。

三、管位、板位与仓门这些机械件

荧光计没有液路、没有泵、没有阀，会坏的机械件就那几个：管位、板架、仓门、按键。管位松动，管子放进去不正，光路偏一点，读数就散；板架变形，九十六孔板放不平，边上的孔读数偏低；仓门关不严，环境光进来，整批偏高。这三样占了机械故障的多数。

管位要定期看。用法是拿一根标准管，在同一个孔位连测五次，再换到其他孔位各测一次，比较孔间差异。差异在允许范围内说明管位正常，超出就要检查孔内有没有残渣、弹簧有没有失效。这一步用不了十分钟，却能提前几个月发现问题。

板式机还要看进仓机构。板子推入时不顺、进出有异响、定位有偏移，都说明导轨或者传动件该清洁了。断电之后用干布擦导轨，不要加润滑油，油会吸灰，越加越卡。这一条与很多人的直觉相反，但确实是厂家的建议。擦完手动开合几次，确认顺畅再通电，这一步别省，卡着推容易把传动齿轮顶坏，换个齿轮要返厂。

仓门与密封条容易被忽略。密封条老化之后关不严，肉眼看不出来，但环境光会一点点漏进去，表现为所有样品都偏高一点点，而且高得稳定，看着不像故障。每半年检查一次密封条有没有变形、有没有开裂，比出问题再查省事得多。

四、校准、质控与换试剂的节奏

校准的频率取决于用法。天天用的机器，建议每月做一次两点校准；一周用两三次的，每次开机做一次单点核查，每月做一次两点校准。校准不是越勤越好，做得太勤反而引入人为误差，关键是记录：每次校准的日期、标准液批号、两个点的读数，都要留下。

质控是另一件事。校准是给机器定标，质控是看机器有没有漂。做法是备一份已知浓度的质控液，分装冷冻，每次检测带一支一起做，看结果落在不在历史区间。这一支的成本很低，却能最早发现试剂、管子、机器三方面的变化，比任何自检功能都灵敏。

换试剂必须重做校准，这条没有例外。不同厂家的染料浓度、缓冲体系、孵育时间都不同，曲线不通用。换试剂之后的第一批数据要格外小心，建议先做一次新旧试剂比对，用同一份样品在两套试剂上各测一次，看平移多少，平移在允许范围内才算切换成功。

表1 校准与质控的频次建议

表注：校准与质控记录应含日期、批号、读数与结论，保存到报告出具之后；恒美智造 HM-QT 系列均为两点校准，线性范围五个数量级。

五、寄修之前要做的四件事

第一件，确认不是操作问题。按前面的四种情形自查一遍：全线偏低看校准与试剂，全线偏高看空白与管子，个别异常看样品，忽高忽低看仓门与管位。这四步做完，多数问题能就地解决，不必寄修。寄一趟来回一周，这一周里所有检测都要停。确实需要寄修的，先把这一轮自查的结果一并写进报修单，工程师能省掉复述的功夫。

第二件，把现象记下来。什么时候开始的、突然还是渐进、哪个型号、机身编号多少、同一份样连测五次的读数分别是多少。这几项写清楚，工程师在电话里就能判断大概方向。只说一句测不准，等于让对方从零开始猜，来回问五六轮是常态。

第三件，把样品与耗材分开。寄修的时候管子、试剂、样品都不要随机寄，机器里也不要留液体。管位里如果有碎管或者残液，运输途中会晃动，可能造成二次损坏。清空、擦干、装回原包装，是最基本的动作。还有一条：寄之前把机器里的使用记录导一份留底，修回来之后可以与新记录对照，看有没有被清空或者复位。

第四件，问清三件事：多久回话、修好大概几天、来回运费谁承担。保修期内与保修期外差别不小，尤其运费这一项，跨省来回能差出几百块。问清楚再寄，避免修完才发现费用超出预期。寄的时候保价，按机器原价保，别按运费保。这一项不写清楚，运费常常比维修费还让人意外。

六、十二种实际会碰到的状况

开机没有反应。先确认电源适配器是不是原配，这类机器多是直流五伏输入，用错适配器电压不够就开不了机；再换一个插座试，最后看电源线有没有断。开机之后屏幕亮但进不去系统，断电等三十秒再开，仍不行就联系厂家，不要反复强制关机。

读数一直显示满量程或者超出范围。样品太浓，稀释之后重测；稀释后仍然满量程，检查是不是把两种染料加反了，双通道机型的两个试剂位置很容易搞混。读数一直是零。先看管里有没有液体、管子有没有放到底，再看光源是否被关闭，最后才是光路问题。

同一份样连测五次，极差超过百分之十五。先看管壁有没有水珠与指纹，再看管里有没有气泡，最后看仓盖有没有关严。三条排完仍然差，换一根新管重测。新管也差，说明样品本身不均匀，重新混匀再取。如果换管、换孔位都差，就把这份样静置十分钟再测一次，还差就是样品本身在变，不是机器在变。

换了一批试剂，整体数值平移。这是批间差的正常表现，做一次新旧试剂比对，重做两点校准即可；平移超过百分之二十，联系供应商确认批次。校准做不过去。先看标准液是不是过期或者保存不当，再看两个标准点的读数是否有区分度，点太近就定不出线。

管位放进管子之后读数跳。检查管位里有没有碎管残渣、弹簧是否失效、管子外壁是否有标签残留。标签撕掉之后的胶痕在光路上，肉眼几乎看不见，却足以让读数发散。板式机某一列孔全部偏低。看板架是否放平、该列对应的检测窗口是否有污渍，多数是窗口的问题。

打印不出结果或者字迹很淡。热敏纸只有一面显色，装反了打出来是空白；字迹淡多半是打印头积了纸屑，断电后用无水乙醇棉签顺着一个方向擦。数据导不出来。先确认存储有没有写满，再换一个存储介质，导出前按日期筛选，避免一次导出太多条卡住。

屏幕触控不准。触控失灵先擦屏幕，油污和汗渍会让触控跑偏，擦完再做一次校准；校准完还是偏，多半是排线松动，这不影响检测结果，先用外接鼠标顶一段时间。机器搬动之后读数整体变了。先检查水平，再看管位有没有松动，运输途中的震动最容易让管位错位，重新做一次管位一致性检查。

长期不用之后开机异常。先充满电再开，锂电池放久了会进入保护状态；再看仓内有没有受潮，湿度大的季节建议放一包干燥剂。内置电池续航变短。锂电池怕长期满电存放与深度放空，平时存到半电左右，一个月做一次完整充放，冬季续航缩短属正常。

结果与另一台机器对不上。先确认两台用的是同一批试剂、同样的取样体积、同样长度的时间；三样都一致仍然差，做一次两台机器对同一份质控液的比对，差在哪一段（低浓度还是高浓度）往往能指出是哪一台偏了。对不上的时候不要急着判定谁不准，先看两台机器最近一次校准分别在什么时候，多数分歧就出在这里，校准日期差一个月的两台机器，本来就不该拿来直接比。

二维码扫不出来。二维码印得太淡扫不动，调高打印浓度或者换一卷纸；扫出来信息不全，看软件里的字段模板是不是漏勾了项。上传平台失败。先确认网络通不通，再看平台地址与账号有没有变更，最后看数据格式是不是被平台改版影响了。

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